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          2015版中國藥典款冬花液相色譜分析
          更新時間:2018-07-04   點擊次數:4530次

          ■《中國藥典》 收載情況

          【來源】 本品為菊科植物款冬Tussilago farfaraL.的干燥花蕾。
          【功能與主治】 潤肺下氣,止咳化痰。用于新久咳嗽,喘咳痰多,勞嗽咳血。
          【含量測定】 款冬酮照液相色譜法(通則0512)測定。
          色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(85:15)為流動相;檢測波長為220nm。理論板數按款冬酮峰計算應不低于5000。
          對照品溶液的制備:取款冬酮對照品適量,精密稱定,加流動相制成每1mL含50μg的溶液,即得。
          供試品溶液的制備:取本品粉末(過4號篩)約1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇20mL,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40kHZ)1小時,放冷,再稱定重量,用乙醇補足減失的重量,搖勻,取續濾液,即得。
          測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μL,注入液相色譜儀,測定,即得。

          ■款冬花藥材液相色譜方法的建立

          【色譜行為描述】
            《中國藥典》中款冬花的含量測定以款冬酮為質量評價依據,其在Inertsil ODS-3(4.6×250mm,5μm )中的色譜行為是:在流動相組成為甲醇-水系統時,峰與雜質峰距離較近,流動相的比例對款冬酮及相鄰峰的分離有顯著的影響,流動相的比例為甲醇-水(75:25)時其分離效果,款冬花色譜圖中雜質峰與款冬酮峰的分離效果較好,且款冬酮峰的保留時間比較合適;柱溫對款冬酮的保留時間及與相鄰色譜峰的分離度有微小影響。推薦流動相配比范圍:甲醇:水=(75-76):(25-24),柱溫范圍:25-40℃。經過考察,在流動相甲醇-水比例為75:25,柱溫40℃的色譜條件下能得到較滿意的分析效果。
            在上述色譜條件下,采用Shim-pack VP-ODS(4.6×250mm,5μm )色譜柱,柱效和采用Inertsil ODS-3(4.6×250mm,5μm )色譜柱相當,保留時間比采用Inertsil ODS-3(4.6×250mm,5μm )色譜柱短大約7min,亦可得到良好的分析效果。
          樣品來源: 本品為菊科植物款冬Tussilago farfaraL.的干燥花蕾。
          對照品: 款冬酮(中國科學院成都生物研究所,批號:MUST-15092401,含量:98.92%)
          對照品溶液的制備: 取款冬酮對照品適量,精密稱定,加流動相制成每1mL含50μg的溶液,即得。
          供試品溶液的制備: 取本品粉末(過4號篩)約1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇20mL,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40kHZ)1小時,放冷,再稱定重量,用乙醇補足減失的重量,搖勻,取續濾液,即得。

          推薦使用色譜條件: 儀器配置:
          色譜柱:5020-01732 Inertsil ODS-3 (4.6×250mm,5μm ) LC-20AD 高壓泵
          流動相:甲醇-水(75:25) SPD-10AVP紫外可見光檢測器
          柱溫:40℃ DGU-20A3脫氣機
          檢測波長:220nm CTO-20AS柱溫箱
          流速:1.0mL/min SIL-10ADvp自動進樣器
          進樣量:10μL  
          *此條件同樣適用于Shim-pack VP-ODS(4.6×250mm, 5μm)色譜柱,相關譜圖見附注1。

          ■款冬酮對照品溶液:

          ■供試品溶液:

          ■款冬酮標準曲線:

          ■款冬酮的重復性:

          序號對照品(10μL)樣品(10μL)
          t/min峰面積t/min峰面積
          127.797129405827.6681517747
          227.766128909227.6291517225
          327.782129124627.6681519401
          平均值27.782129146527.6551518124
          RSD/%0.050.190.080.07

          附注1:Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm,5μm )色譜柱用于款冬花分析 

          ■款冬酮對照品溶液:

          ■供試品溶液:

          * 實驗數據由北京大學醫學部陳世忠教授課題組提供

           

           

           

           

           

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